|
高效液相色譜(HPLC)柱的填裝方法,直接影響柱效、理論塔板數、分離重復性與柱壽命。常用于實驗室及工業界的主流填裝工藝主要有五種,分別是: 1. 濕法填裝(Slurry Packing,濕法裝柱) 原理: 將色譜填料先用適宜溶劑制成懸浮漿料,通過高壓將漿料裝填到色譜柱內。 過程: 配制懸浮漿料,保持均勻分散。 利用高壓泵或加壓氣體將漿料注入柱管。 保持壓力,使填料充分堆積、定型。 裝頂塞、平衡柱子。 優點: 粒子分布均勻、柱效高、適用于粒徑3~10μm常規模柱和現代亞2μm UHPLC柱。 應用最廣、實驗室和工業常用。 2. 干法填裝(Dry Packing) 原理: 直接將干燥的填料倒入柱管,通過振蕩或敲擊使其填緊,再用溶劑沖洗、定型。 過程: 將干填料慢慢倒入柱管,適當振動,使其致密堆積。 加入柱頭和頂塞。 用移動相溶劑緩慢沖洗,進一步定型。 優點: 操作簡單,適用于較大粒徑填料(一般>10μm),如重力流柱(玻璃柱、開管柱等),對精密分析用HPLC柱而言已很少采用。 3. 徑向填裝(Radial Compression Packing) 原理: 特殊的裝柱機構設計,使柱壁能產生徑向壓力,對填料進行側向壓緊,改善柱床均勻性。 過程: 采用可調徑向壓力的柱管或模塊,在柱內進行徑向擠壓填裝。 柱床均勻、壓力分布好。 優點: 機械壓實,減少空隙和流動通道,提升柱效。 主要用于大型制備色譜柱和多柱模塊。 4. 動態填裝法(Dynamic Axial Compression Packing,DAC動態軸向壓縮) 原理: 在裝柱和分離過程中,通過柱塞實時、軸向持續加壓壓縮填料,保持填料處于最佳致密狀態。 過程: 柱管一端或兩端有可移動柱塞,與液流同步自動調整壓力,實現動態高壓下填裝和分離。 優點: 柱床不易松弛,柱效穩定,重復填裝簡單。 常用于工業級大型制備柱(如DAC大柱)。 5. 遞增法/分段填裝(Incremental/Stepwise Packing) 原理: 將填料和溶劑以多次、分批的方式逐步裝入柱管,每次裝填量適中,分批加壓整合,避免一次裝填過多造成顆粒分級或密度不均。 過程: 分階段添加填料,每階段都有短暫加壓過程。 循環多次直至填滿柱管,最終高壓定型。 優點: 提高填料均勻度,適合難以一次填滿、柱體較長或粘性較大漿料。 |
- 上一篇:色譜裝柱機操作流程


